心臓トロポニン（cTnI）の検出に関する注意事項

心筋トロポニン（cTnI）は、心筋細胞の損傷を判断するための「ゴールドインデックス」として臨床で広く使用されていますが、cTnIには末梢血で遊離型とcTnI-cTnC、cTnI-cTnTなどのような様々な形態の複合体があり、異なる生産企業間の抗血清とさまざまな形態のcTnI反応との間にはある程度の違いがあるため、測定結果は一貫していません。現在、cTnIの臨床的測定に関する統一基準はなく、測定結果はそれぞれによって決定され、メリット・デメリットの判断はメーカー次第で、ここでは主にcTnI検出の注意点をご紹介します。現在、cTnIの in vitro診断試薬の免疫蛍光定量法があります。イムノクロマト分析は臨床的適合性が高く、cTnI体外診断キットの優先の検出方法となるはずです。同時に、イムノクロマト分析法は、大規模な機器を必要とせず、操作が迅速かつ簡単であり、臨床試験の速度要件を満たす臨床検査を提供できるという利点もあります。したがって、イムノクロマトグラフ定量法は、AMI患者の迅速な初期スクリーニングに使用できます。これにより、クリニックにより信頼性が高く正確な診断基準が提供され、治療効果の臨床モニタリングの理論的サポートが提供されます。

cTnI検出の注意事項

同じサンプルの検出値が検出方法によって異なる理由は、主に、使用する診断用抗体原料の特異性が異なるためです。心臓トロポニン（cTnI）は体内ではさまざまな形で存在しますが、さまざまな試薬の抗体は正確に何を検出しますか。考慮すべき点がいくつかあります。

トロポニンTnは筋収縮の調節因子であり、TnIと他の2つのサブユニットTnCおよびTnTの結合定数は、それぞれ1.5 * 108（Ca2 +の存在下）と4.4 * 105です。一部の研究者は、人体のcTnIは最初にTnI-TnC-TnTの形で人間の血中に放出され、すぐにTnI-TnC複合体とTnTの形に分解されることを示唆しているため、患者の血清中のcTnIのほとんどはTnI- TnC複合体の形で存在し、精製または遺伝的に発現されたcTnI抗体はその複合型を認識しない場合がありますが、一部はcTnI単量体よりも複合体に対して強い親和性を持っています。したがって、cTnIモノクローナル抗体を正確に測定するには、cTnIの遊離モノマーとその複合体の両方を認識できなければならず、かつ複合体の影響に敏感ではないことを要します。

TnIは加水分解性の高い分子であり、心筋壊死の過程で心筋細胞のミトコンドリアにあるさまざまなタンパク質分解酵素が放出されるため、心筋トロポニン（cTnI）は加水分解性の高い環境になります。 cTnI加水分解の特定の時間とその加水分解に関与する特定の酵素は明確ではありません。 In vitro試験では、20時間後、壊死組織のcTnIの1％〜3％のみが無傷のままであったことが示されました。Morjanaの試験では、cTnIが最初に血液のC末端で分解され、製品の一部がN末端から分解され、最終的には、分子量がそれぞれ18kdと14kdの二つの加水分解物が得られました。全体的に、中央の28〜110残基は安定したエリアです。 Shiの研究によると、中間部分の前半の安定性はその一次構造によるものであり、後半の安定性はTnI-TnC複合体におけるTnCの保護によるものです。 Shiはまた、実験でさまざまなcTnI検出試薬を比較し、使用した抗体の一部はcTnIのN末端を認識し、一部はC末端を認識し、一部は中央部分を認識しました。現在、研究者と生産者の間のコンセンサスは、cTnIを検出する抗体がその安定した中間領域を標的にするべきであるということです。

心筋トロポニン（cTnI）分子の22番目と23番目の残基は2つのSerであり、体内のKinanse Aによってリン酸化されるため、梗塞患者の血液には4つのリン酸化型のcTnI分子が理論的に存在します。 それぞれは非リン酸化状態、22Serリン酸化状態、23Serリン酸化状態、22、23Serリン酸化状態です。 Katrukhaらは免疫学的方法を使用して、患者の血清中のcTnIのかなりの部分がリン酸化状態にあることを証明し、Marstonらは放射性実験を通じて損傷した心筋のリン酸化cTnIが正常な心筋のそれよりも少ないことを発見しました。リン酸化はcTnI分子のコンフォメーションを大きく変化させ、それによっていくつかの抗体の分子への結合に影響を与えます。

心臓トロポニン（cTnI）には2つのCys残基（Cys-79とCys-96）が含まれています。チオール基の酸化は、TnIと他のTnサブユニットの結合に影響し、モノクローナル抗体への結合にも影響する可能性があります。体内で放出されたcTnIには、酸化型と還元型の両方があります。 Wuらは、一部の検出試薬はcTnIの酸化型を認識する能力が強いが、ほとんどの試薬は2種類の認識を区別しないことを発見しました。専門家は、検出に使用される抗体は残基79と96に耐性がなく、酸化型と還元型の両方を認識できないことを指摘しました。